淀粉氮含量測(cè)定詳細(xì)流程
淀粉類樣品定氮檢測(cè)，最重要的環(huán)節(jié)是淀粉樣品消化過(guò)程，消煮過(guò)程控制好升溫速率，適量加入雙氧水來(lái)加快消煮能更好更快速的完成消煮實(shí)驗(yàn)。試驗(yàn)證明，采用凱氏定氮儀測(cè)定相比傳統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定更方便，能加快實(shí)驗(yàn)的效率。接下來(lái)就讓我們一起來(lái)學(xué)習(xí)一下淀粉氮含量測(cè)定的詳細(xì)步驟吧！
一、取樣：
稱取10g淀粉樣品，精確至0.0001g，然后倒入干燥凱氏燒瓶?jī)?nèi)，注意不要將樣品沾在瓶頸內(nèi)壁上。對(duì)粘狀或糊狀樣品，則可用一個(gè)小玻璃盛器或不產(chǎn)生氮的鋁片紙或塑料上稱重，或氮含量已知的盛器，盛品留在瓶?jī)?nèi)，如盛器產(chǎn)生氮的話，應(yīng)做空白測(cè)定后折算。
二、消煮
加入催化劑10g，并用量筒加入體積為4倍樣品重量計(jì)算的毫升濃硫酸。輕輕擺動(dòng)燒瓶，混合瓶?jī)?nèi)樣品，直至團(tuán)塊消失，樣品完全濕透，加入防沸物(如玻璃珠)。燒瓶放到消化架上，裝上排氣裝置，開(kāi)始加熱裂解。小心加熱液體，使之逐漸沸騰，待液體澄清后繼續(xù)加熱1小時(shí)。
三、試樣處理：
①使用滴管稱取約2g左右的淀粉樣品，15ml濃硫酸，2g左右的催化劑（硫酸銅硫酸鉀），靜置半小時(shí)。
②放置于消煮爐上，正常升溫至100℃（開(kāi)始變黑）。
③100℃持續(xù)10分鐘，升至150℃（完全變黑，并開(kāi)始出現(xiàn)泡沫）。
④升溫至200℃過(guò)程中，同時(shí)加入10滴30%的過(guò)氧化氫溶液。
⑤200℃穩(wěn)定5分鐘，加入10滴30%的過(guò)氧化氫溶液。
⑥升至250℃，同時(shí)加入10滴30%的過(guò)氧化氫溶液。
⑦穩(wěn)定10分鐘，升至300℃，同時(shí)加入5滴30%的過(guò)氧化氫溶液。
⑧穩(wěn)定10分鐘，升至400℃，同時(shí)加入5滴30%的過(guò)氧化氫溶液。
⑨間隔10分鐘加入5滴30%的過(guò)氧化氫溶液，直至溶液中固體（黑色泡沫）完全溶解。
⑩等待溶液變?yōu)橥该鞯乃{(lán)綠色時(shí)繼續(xù)加熱1小時(shí)。
四、測(cè)定：
消解完之后將樣品冷卻至室溫，即可使用凱氏定氮儀測(cè)定凱氏氮含量，得到的氮含量乘以相對(duì)應(yīng)的系數(shù)可得到蛋白質(zhì)的含量。
