人工氣候室比較3種青枯菌接種方法效果
來(lái)源： http://www.feta-virtual.com 類(lèi)別：實(shí)用技術(shù) 更新時(shí)間：2014-12-08 閱讀次
【本資訊由中國(guó)糧油儀器網(wǎng)提供】 鑒定高致病力的青枯菌菌株并采用簡(jiǎn)便、高效、適用于田間大規(guī)模篩選的抗病性鑒定方法就成為抗病育種的關(guān)鍵。試驗(yàn)對(duì)青枯菌菌株進(jìn)行了生化型鑒定,于人工氣候室比較了3種不同的青枯菌接種方法,得出高致病力的菌株和較好的抗病性鑒定方法,為番茄青枯病育種提供指導(dǎo)。
試驗(yàn)在人工氣候室進(jìn)行,材料為5~6片真葉的生長(zhǎng)期為35d的番茄幼苗，智能人工氣候室的溫度為28℃,相對(duì)濕度為80%。病組織采集自田間新發(fā)病的病癥嚴(yán)重的植株,用剪刀剪取發(fā)病中心部位約10cm長(zhǎng)的莖段。先用蒸餾水沖洗干凈,再用75%的酒精表面消毒。用滅菌的小刀或剪刀將其剪成每段3~4cm,然后均放入盛有200mL滅菌水的燒杯中浸泡1~2h。
從病組織橫斷面向水中流出白絲狀的病原菌,確認(rèn)懸浮液變混濁后,輕輕搖晃使其上下均勻,然后吸入到2mL的離心管中再用接種環(huán)沾取菌原液在TTC培養(yǎng)基上畫(huà)蛇線,放入人工氣候室培養(yǎng)室中30℃培養(yǎng)2d,觀察并挑選典型的單菌落(以下簡(jiǎn)稱(chēng)Rs)。形態(tài)學(xué)觀察典型的強(qiáng)致病力菌落呈不規(guī)則圓形略突起,乳白色中心淡粉紅色,周?chē)走呡^寬,具流動(dòng)性。
觀察人工氣候室培養(yǎng)2d、7d、14d之后,看到培養(yǎng)基表面的顏色均由橄欖綠色變?yōu)槌壬?據(jù)此表明:智能人工氣候室試驗(yàn)分離出的青枯菌菌株RS-42對(duì)6種不同的碳源均呈陽(yáng)性反應(yīng),由此確定病原菌菌株為生化型。曾番茄試驗(yàn)場(chǎng)的新鮮青枯病發(fā)病植株通過(guò)人工氣候室進(jìn)行了病原菌的分離培養(yǎng),用經(jīng)典的傷根灌注法進(jìn)行了人工接種試驗(yàn),在接種后1個(gè)月的時(shí)間內(nèi),只有氣生根出現(xiàn),沒(méi)有典型的青枯病葉片萎蔫病癥發(fā)生�！ �
試驗(yàn)在人工氣候室進(jìn)行,材料為5~6片真葉的生長(zhǎng)期為35d的番茄幼苗，智能人工氣候室的溫度為28℃,相對(duì)濕度為80%。病組織采集自田間新發(fā)病的病癥嚴(yán)重的植株,用剪刀剪取發(fā)病中心部位約10cm長(zhǎng)的莖段。先用蒸餾水沖洗干凈,再用75%的酒精表面消毒。用滅菌的小刀或剪刀將其剪成每段3~4cm,然后均放入盛有200mL滅菌水的燒杯中浸泡1~2h。
從病組織橫斷面向水中流出白絲狀的病原菌,確認(rèn)懸浮液變混濁后,輕輕搖晃使其上下均勻,然后吸入到2mL的離心管中再用接種環(huán)沾取菌原液在TTC培養(yǎng)基上畫(huà)蛇線,放入人工氣候室培養(yǎng)室中30℃培養(yǎng)2d,觀察并挑選典型的單菌落(以下簡(jiǎn)稱(chēng)Rs)。形態(tài)學(xué)觀察典型的強(qiáng)致病力菌落呈不規(guī)則圓形略突起,乳白色中心淡粉紅色,周?chē)走呡^寬,具流動(dòng)性。
觀察人工氣候室培養(yǎng)2d、7d、14d之后,看到培養(yǎng)基表面的顏色均由橄欖綠色變?yōu)槌壬?據(jù)此表明:智能人工氣候室試驗(yàn)分離出的青枯菌菌株RS-42對(duì)6種不同的碳源均呈陽(yáng)性反應(yīng),由此確定病原菌菌株為生化型。曾番茄試驗(yàn)場(chǎng)的新鮮青枯病發(fā)病植株通過(guò)人工氣候室進(jìn)行了病原菌的分離培養(yǎng),用經(jīng)典的傷根灌注法進(jìn)行了人工接種試驗(yàn),在接種后1個(gè)月的時(shí)間內(nèi),只有氣生根出現(xiàn),沒(méi)有典型的青枯病葉片萎蔫病癥發(fā)生�！ �
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